如何建一個標準的PCR 實驗室? PCR實驗室如何設(shè)計規(guī)劃才堪稱專業(yè)? PCR實驗室管理又有哪些注意要點? 本文讓你以0開始搞PCR實驗室規(guī)劃設(shè)計。標準的PCR 實驗室分為四個區(qū)域，分別為:

1.試劑配制區(qū)

2.樣品處理區(qū)

3.核酸擴增區(qū);

4.產(chǎn)物分析區(qū):

ps:進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出

、PCR實驗室平面布局

各區(qū)的功能分別為:

試劑準備區(qū):擴增試劑的配制、分裝和保存。

樣品處理區(qū):樣品登記、分裝，核酸提取、保存和加樣。

擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告。

擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔.

使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。

在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi):

在生物安全柜內(nèi)操作。

每個實驗人員、實驗組分別使用各自的試劑及耗材.

盛放污染材料的器川密封并一次性使用。

用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒

、PCR實驗室建設(shè)規(guī)劃要點

1.主體結(jié)構(gòu)

主體為彩板、鋁合金型材，室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題，結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封生好子

2.標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)

將PCR過程分成試劑準備、標本制備和CR擴增檢測三個立的實區(qū)，整個區(qū)城有一個整體 中走廊每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有中區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整PCR實

驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

可打開緩中區(qū)1，緩中區(qū)工和PCR 護增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣過同風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

3.消毒

在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線燈，對實驗卓進行局部消毒4.機械連鎖不銹鋼傳遞窗

試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)5.地面

地面建議使用PC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐。沒有條的也可采用水磨地面，或大塊的瓷傳至少800mmx800mm) 接縫需要小于2mm。

5.地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，

耐腐飩。

沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚

(至少800mmx800mm) 接縫需要小于2mm

6.照明

燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點.

ps: 在建設(shè)的過程中應(yīng)注意:

。規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程

。嚴格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計的安裝流程

安裝前需要確定以下安裝條件，如:電電壓，電源進線置，電活網(wǎng)絡(luò)線進線置，進水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的

空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

三、設(shè)計要點

PCR實驗室可以是分散州式，也可以是組合形式，完成一PCR實驗，通常應(yīng)經(jīng)過試劑制、樣品處理，核擴增及產(chǎn)物分橋四個實過程，若實驗工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉

碎過程。

1.分散形式PCR實驗室

所謂分散形R實驗室，是指完成上述實過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特

殊條件要求。2.組合形式PCR實驗室所情組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四實驗過程的實驗用房相鄰布置，成獨立實驗區(qū)的形式。對于組合形式PCR實驗室，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。四、PCR實驗室主要設(shè)備

1.試劑準備區(qū)

儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機等，加樣器、，天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準。試劑分裝應(yīng)在超凈臺中進行擴增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢: 一是否有污染、二是檢測試劑的擴增效果。2.標本制備區(qū)

儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等

3.擴增區(qū)擴增區(qū)的主要儀露是核的廣增儀、超爭臺、微量加樣器、離心機、可移動外燈。擴增儀需進行校準，并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動，停電對廣增效果的影響，4.分析區(qū)

本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等潔凈實驗區(qū)的中間部分面積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規(guī)定的.

五、一些瑣碎的、不可忽略的設(shè)計

1.實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制

PCR實驗室并沒有嚴格的凈要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排網(wǎng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。

2.污染的預(yù)防與控制

PCR實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染，在實際工中，常見的有以下幾種污染類型:擴增產(chǎn)物的污染，天然基因組DNA的污染劑的污染以及標本間的污染，由于一發(fā)生污染，實驗就必須停止，直到到污染源為止，而且實驗結(jié)果必須作廢，需重新進行實驗，所以發(fā)生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且數(shù)班，浪費人力物力。因此要避免污染，首先應(yīng)是預(yù)防，而不是排排除

六、PCR實驗室不可缺少的嚴格管理

,嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關(guān)的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設(shè)置獨立的通道和進出整個實驗區(qū)的門.

2.盡量減少在實驗區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性。

3擴增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的廣增產(chǎn)物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經(jīng)消毒液漫泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液漫泡消

毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等。

4.擴增產(chǎn)物分析區(qū)可能會用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實驗人員的安全防護。5,完備的實驗室配套設(shè)施，完備的實室套設(shè)施是保證實驗工作的以要條件，應(yīng)根各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)和儀器，如超爭工作臺、離心機、加樣器等